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快速液相色譜柱的使用禁忌可得了解清楚,才能獲取更好的結(jié)果

發(fā)布時(shí)間:2022-09-28?00:00:00      點(diǎn)擊次數(shù):5297

  隨著各領(lǐng)域的發(fā)展,快速液相色譜柱技術(shù)也面臨著一些新的需求,包括更高的分離效率、更快的分離速度、更好的化學(xué)穩(wěn)定性、更大的峰容量及更適宜的分離模式等。那么如此常見且消耗量巨大的實(shí)驗(yàn)室耗材,在使用上有什么禁忌呢?一起來了解一下吧。

  快速液相色譜柱的使用禁忌

  1.避免壓力和溫度的急劇變化

  溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會(huì)影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會(huì)沖動(dòng)柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,以保持色譜柱內(nèi)填料的穩(wěn)定性。

  2.避免直接改變?nèi)軇┑慕M成

  在需要改變檢測(cè)樣品溶液組成是,應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成,特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然。且在使用次洗脫能力?qiáng)的 洗脫液沖洗色譜柱時(shí),對(duì)流路系統(tǒng)中流動(dòng)相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動(dòng)相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml。

  3.避免色譜柱反沖

  一般來說色譜柱不能反沖,只有快速液相色譜柱使用說明書上標(biāo)明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質(zhì)。否則,反沖色譜柱的影響是迅速降低柱效。

  4.避免流動(dòng)相使用不當(dāng)而破壞固定相

  選擇使用適宜的流動(dòng)相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一段預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動(dòng)相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠"飽和",避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。

  5.禁止樣品未經(jīng)處理直接進(jìn)入色譜柱

  避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。

  6.禁止將緩沖溶液長時(shí)間存放在色譜柱內(nèi)

  保存色譜柱時(shí)應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時(shí)間。

  7.禁止色譜柱未經(jīng)處理直接封存

  快速液相色譜柱使用完成之后須使用相宜溶劑進(jìn)行清潔處理,例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡;當(dāng)采用鹽緩沖溶液作流動(dòng)相時(shí),使用完后應(yīng)用無鹽流動(dòng)相沖洗;含鹵族 元素(氟、氯、溴)的化合物可能會(huì)腐蝕不銹鋼管道,不宜長期與之接觸;裝在液相色譜儀上的色譜柱如不經(jīng)常使用,應(yīng)每隔4-5天開機(jī)沖洗15分鐘。


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